





溶液的pH值決定帶電物質(zhì)的解離程度,也決定物質(zhì)所帶凈電荷的多少.對蛋白質(zhì),氨基酸等類似兩性電解質(zhì),pH值離等電點越遠(yuǎn),粒子所帶電荷越多,泳動速度越快,反之越慢。因此,當(dāng)分離某一種混合物時,應(yīng)選擇一種能擴(kuò)大各種蛋白質(zhì)所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質(zhì)的有效分離.為了保證電泳過程中溶液的pH值恒定,必須采用緩沖溶液。
緩沖液的離子強度
溶液的離子強度(Ion intensity)是指溶液中各離子的摩爾濃度與離子價數(shù)平方的積的總和的1/2.帶電顆粒的遷移率與離子強度的平方根成反比。低離子強度時,遷移率快,但離子強度過低,緩沖液的緩沖容量小,不易維持pH恒定.高離子強度時,遷移率慢,但電泳譜帶要比低離子強度時細(xì)窄。通常溶液的離子強度在0.02~0.2之間。
I=1/2∑CiZi2 (I:離子強度;Ci:離子的摩爾濃度;Zi:離子價數(shù). )
0.154M NaCl溶液的離子強度為:
I= 1/2(0.154×12+0.154×12)=0.154
0.015M Na2SO4溶液的離子強度為:
I= 1/2(0.015×2×12+0.015×22)=0.045
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